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体外细胞转染试剂产品挑选攻略
转染的类型
细胞转染试剂已经成为研讨和操控真核细胞基因功能的惯例试剂，转染试剂在基因功能研讨、基因表达调控、骤变剖析，以及基因医治、细胞医治、蛋白出产、疫苗出产等方面使用广泛。
依据转染后核酸是否整合到宿主细胞染色体中分红“瞬转”（瞬时转染）和“稳转”（安稳转染）。不同转染办法的转染功率、细胞毒性、对正常生理学的影响和基因表达水平各不相同，其原理、使用与特色比较如下表所示：
表1 不同转染办法的比较
技能 | 原理 | 长处 | 缺陷 |
化学转染办法 | |||
阳离子脂质体 | 带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团构成复合物被细胞内吞。 | 操作快速简略 成果可重复 转染功率高 可转染DNA，RNA和蛋白质 适用于出产瞬时和安稳的蛋白质 可用于体内转染 | 需进行条件优化(一些细胞系对阳离子脂质体较灵敏) 有些细胞系不简略转染 血清的存在搅扰复合物的构成，导致低转染功率 培养基中血清的缺失会添加细胞毒性 |
磷酸钙共沉淀 | 磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞 | 廉价且简略取得 适用于出产瞬时和安稳的蛋白质 转染功率高（不约束细胞系） | 需求细心制备试剂 – CaPO4溶液对pH，温度和缓冲盐浓度的改变灵敏 可重复性较差 有细胞毒性，特别对原代细胞 不能选用RPMI培养基，因为其含高浓度的磷酸盐 不适用于动物体内转染 |
葡聚糖 | 带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互效果构成的复合物被细胞内吞。 | 操作简略 成果可重复 廉价 | 对某些细胞有化学毒性 只限于瞬时转染 转染功率低，特别在原代细胞中 |
其他阳离子聚合物 | 带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团构成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互效果，并经过内吞效果进入细胞。 | 在血清中安稳，对温度不灵敏 高转染功率（约束细胞系） 成果可重复 | 对某些细胞有毒性 不能生物降解（树枝状大分子） 多用于瞬时转染，较少用于安稳转染 |
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