一．细胞简介：

　　细胞称号：人小胶质细胞HMC3（STR判定）

　　渠道编号:zl-057055

　　HMC3细胞系经过人类胎儿脑源性初级小胶质细胞培育物的SV40依赖性永生树立。。

　　细胞特性

　　1）来历：人；脑；小胶质

　　2）形状：巨噬细胞样，贴壁成长

　　3）含量：>1x106细胞数

　　4）规范：T25瓶或许1mL冻存管包装

　　5）用处：仅供科研运用。

　　二．细胞的培育

　　培育基及培育冻存条件预备：

　　1）预备MEM培育基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

　　2）培育条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培育箱湿度为70%-80%。

　　3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

　　细胞处理：

　　1）冻存细胞的复苏：

　　将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中敏捷摇晃冻结，参加到含4-6mL彻底培育基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，彻底培育基重悬细胞。然后将细胞悬液参加含6-8ml彻底培育基的培育瓶（或皿）中37℃培育过夜。第二天显微镜下调查细胞成长状况和细胞密度。

　　2）细胞传代：假如细胞密度达80%-90%，即可进行传代培育。

　　贴壁细胞传代办法：

　　1.弃去培育上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

　　2.参加0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培育瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培育箱中消化1-2分钟（难消化的细胞能够恰当延伸消化时刻），然后在显微镜下调查细胞消化状况，若细胞大部分变圆并掉落，敏捷拿回操作台，轻敲几下培育瓶后参加3-4ml含10%FBS的培育基来停止消化。

　　3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培育液后吹匀。将细胞悬液按1：2的份额分到新T25瓶中，增加6-8ml依照说明书要求装备的新的彻底培育基以坚持细胞的成长生机，后续传代根据实际状况按1:2~1:5的份额进行。

　　3）细胞冻存:收到细胞后主张在培育前3代时冻存一批细胞种子以备后续试验运用。

　　三.运送和保存

　　干冰运送及复苏好存活细胞

　　（1）1mL冻存管包装干冰运送，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已蒸发洁净、冻存管瓶盖掉落、破损及细胞有污染，请当即与咱们联络。

　　（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后依照细胞接纳后的处理办法操作。

　　细胞接纳后的处理：

　　1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培育箱放置约2-3h，若发现培育瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请摄影后及时联络咱们。

　　2）请在4或5X显微镜下承认细胞状况，一起给刚收到的细胞摄影（10×，20×）各2-3张以及培育瓶外观相片一张留存，作为售后时收届时细胞状况的根据。

　　3）贴壁细胞：细胞在37℃培育箱中放置2-3h，显微镜下调查细胞的成长和贴壁状况，有些贴壁细胞在快递运送进程中会因振荡掉落和掉落后成团的状况。若镜下调查细胞的成长密度若在60%以下，可去除培育瓶中灌液培育基（若有未贴壁的细胞需求离心收回，重悬打入到原培育瓶中）,参加新制造的彻底培育基6-8mL，放到细胞培育箱中持续培育。若细胞成长密度达70%-80%以上，能够对细胞进行传代处理。传代进程中，若因运送振荡掉落的细胞需求离心收回。

　　4）补白：运送用的培育基（灌液培育基）不能再用来培育细胞，请换用依照说明书细胞培育条件新制造的彻底培育基来培育细胞。收到细胞后传代主张T25培育瓶1：2传代。

　　智立中特（武汉）生物科技有限公司是一家集生物研制，出产，出售，售后为一体的高新技术产业公司。具有载体质粒，载体，国内外微生物菌种资源，感受态细胞，培育基，细胞株等广泛的出产出售线。

　　质粒载体产品：

　　供给各种类型载体宿主，基因种属类型，抗性，规划并构建质粒：大肠杆菌表达载体；哺乳动物表达载体；酵母表达载体；昆虫表达载体；植物表达载体；广;腺病毒载体...常用有pACYC184；pACYCDuet-1；pASK-IBA5plus+FUS(人基因）；pAX01；pBABE-Puro；pBAD24

　　pBI121；pBIFC-bFosVC155；pBIFC-VC15；pCDFDuet-1；pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro；pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro；pBIFC-VN155(I152L)addgene27097；pCDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP-T2A-Puro；pCAGGS；pBiFC-VN173(Plasmid#22010)；pBlueScriptSK(+)；pBlueScriptIISK(+)；pBV220；pCas；pCas9

　　pBR322；pBT3-STE；pBudCE4.1以及结合搬运质粒RP4；pGL4.25[luc2CP/minP];pGR106;pIRES2-AcGFP1-Nuc;psfGFP;pHEN1;pNL1.1[Nluc];pBBR1-GFP；pBMTB-5;pBMTB-4;pBMTB-3;pBMTB-2;pCAMBIA0305.1;pCX-DR;;pGreenII0800-miRNA;pK7GWIWG2(I);pRARE;pDG1663

　　质粒菌种产品：

　　E.coliNissle1917；USA300：大肠杆菌JM108；希瓦氏菌属MR-1；E.coliW3110野生型；酿酒酵母W303a；酿酒酵母invsc1；酿酒酵母BY4741；酿酒酵母BY4742；毕赤酵母SMD1168H；PseudomonasputidaKT2440；E.coliMC1061；枯草芽孢杆菌WB800；根癌农杆菌EHA105；根癌农杆菌GV3101；CEN.PK2-1D；CEN.PK2-1C；全耐药鲍曼不动杆菌；哈维弧菌BB170

　　菌种产品：

　　供给方式菌种，科研菌种，一般菌种等菌种资源，有证质控样品等微生物规范品，芽孢悬液。常用药典菌种如：大肠埃希氏菌CMCC（B）44102、黑曲霉CMCC（F）98003,白色念珠菌CMCC(F)98001,枯草芽孢杆菌CMCC（B）63501,铜绿假单胞菌CMCC（B）10104,生孢梭菌CMCC（B）64941;常用益生菌：长双歧杆菌（Bifidobacteriumlongum）,嗜热链球菌（Streptococcusthermophilus），鼠李糖乳杆菌（Lactobacillusrhamnosus），类干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei），干酪乳杆菌（Lactobacilluscasei）；常用真菌：松口蘑Tricholomamatsutake，灰葡萄孢bio-81601cfcc50437Botrytiscinerea；灵芝，香菇，茯苓等

　　原代细胞和细胞系产品：

　　现取不同安排现分：不同来历人/鼠/兔/猪等不同安排如肺、气管、支气管、甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺、肾、膀胱、输尿管、前列腺、心脏、血管。常用原代细胞有：气管上皮细胞；前列腺上皮细胞；膀胱上皮细胞；输尿管上皮细胞；肾足细胞；内皮祖细胞；输卵管上皮细胞；乳腺上皮细胞

　　公司供给细胞系人源做过STR判定，其他做过种属判定，保证产品无误后方可供给客户，方式冻存或复苏节约客户时刻；保证试验顺畅。常用细胞系有：WB-F344细胞；RG2[D74]细胞；NRK细胞；A7r5细胞；L6细胞；UMNSAH/DF-1细胞；MDBK(NBL-1)细胞；MDBK细胞；CCC-SMC-1细胞；PtK1(NBL-3)细胞；Mv1Lu细胞；Mv.1.Lu(NBL-7)细胞；F81细胞；CRFK细胞；MLTC-1细胞；MS1细胞；C3H/10T1/2,Clone8细胞；GL261细胞；P3X63Ag8.653细胞；HCC38细胞；ZR-75-30细胞；SK-LU-1细胞；NCI-H2087细胞；SK-N-MC细胞；Hs895.T细胞