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焦磷酸盐(PPi)是经过许多生化反响发生的,例如ATP水解、DNA和RNA聚合、腺苷酸环化酶构成环状AMP以及脂肪酸的酶促活化以构成其辅丨酶A酯。艾美捷PhosphoWroks™ 焦磷酸盐检测试剂盒为丈量焦磷酸盐供给了牢靠的分光光度法。
艾美捷荧光法焦磷酸检测试剂盒运用专有的荧光焦磷酸盐传感器,其荧光强度与焦磷酸盐浓度成正比。与酶偶联焦磷酸盐办法比较,检测办法更简单、更牢靠,后者需求至少两种酶来检测焦磷酸盐。该试剂盒供给了测定焦磷酸盐的一切基本成分。该试剂盒已成功用于高通量挑选(HTS)。
艾美捷荧光法焦磷酸检测试剂盒荧光酶标仪:
励磁316纳米
排放456纳米
间隔420纳米
引荐板纯黑色
艾美捷荧光法焦磷酸检测试剂盒组件:
组分A:检测缓冲液1瓶(25毫升)
组件B:PPi传感器1小瓶(冻干粉)
组分C:焦磷酸盐规范品1瓶(1毫升,50毫米)
组分D:二甲基亚砜1瓶(200 µL)
规范溶液的制备:
焦磷酸盐规范品
将50μL的1 mM焦磷酸盐规范溶液参加450μL的ddH2O或50 mM Hepes缓冲液中,以取得100μM焦磷酸盐规范溶液(PS7)。取100μM焦磷酸盐规范溶液并在ddH2O或50 mM Hepes缓冲液中进行1:3接连稀释,以取得接连稀释的焦磷酸盐规范溶液(PS6 - PS1)。
准备作业解决方案:
将25μL的200X PPi传感器原液参加5 mL的检测缓冲液(组分A)中,并充沛混合以制成PPi作业溶液。
留意因为该检测对PPi的高灵敏度,运用不含PPi的实验室用具和试剂非常重要。DTT≥1 mM会添加布景,MgCl 2≥2 mM会下降呼应。
艾美捷荧光法焦磷酸检测试剂盒示例:
图:运用荧光酶标仪在纯黑色96孔板中运用PhosphoWorks™ 荧光焦磷酸盐检测试剂盒丈量焦磷酸盐、ATP和磷酸盐剂量反响。
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