细胞培育被支原体污染是极遍及的问题，面临支原体污染给细胞培育带来的巨大难题，世界各国开端注重，并相继建立了细胞库，对细胞质量发展操控，作用显着，支原体污染的问题得以约束。现在已知能污染细胞的支原体有20多种以上，其间95％以上的支原体污染是口腔支原体。

现在已知的首要污染源是动物血清、胰酶和已污染培育物的气溶胶，例如，猪鼻支原体经过胰酶，在消化细胞时进入细胞培育物，并形成污染。在原代细胞与传代细胞的检测中，原代细胞与传代细胞别离出支原体的频率是有显着差异的，传代次数越多的细胞，污染支原体的可能性就越大，这也是屡次与动物血清、胰酶和已污染培育物的气溶胶触摸后形成的，在原代细胞中，污染率低于4%，而传代细胞的污染率则高达57%~92%。

支原体是现在已知一类能在无生命培育基上成长繁衍的最小的原核细胞微生物，分为两个属：一为支原体属（Mycoplasma），有几十个种；另一为脲原体属（Ureaplasma），仅有一种。革兰染色为阴性，但不易上色，一般用Giemsa染色，染成淡紫色。

支原体在自然界散布广泛，无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形状易变，极易经过除菌过滤器。大部分支原体繁衍速度比细菌慢，适合成长温度为35℃，适合于偏碱条件下生计（pH7.6—8.0），对酸耐受性差，对75%乙醇、煤酚皂溶液灵敏。对热比较灵敏在细胞培育过程中如果在显微镜下发现破碎的细胞许多，需求频频换液才干保持传代培育的时分，即应置疑支原体污染。细胞培育过程中遇到的支原体95%都来自于以下四种支原体：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾支原体，其间莱氏无胆甾支原体为牛源性。

（1）细胞之间穿插污染；

（2）细胞培育操作人员的口腔、皮肤等；

（3）工作环境或试验器件的污染；

（4）培育基的污染。