配对抗体指的是能够一起结合在一个抗原分子上的两个抗体。配对抗体，一般使用于双抗夹心法 ELISA 试验。

抗体配对的原理

一般情况下，一个抗原分子具有多个抗原决定簇，将抗原注射入动物体内进行免疫，针对不同的抗原决定簇会发生不同的抗体。发生的抗体具有特异性与专一性，即一个抗体分子只会特异性地结合一个抗原决定簇。两个针对不同抗原决定簇的抗体，有或许一起结合到抗原分子上。假如两个抗体一起结合到同一个抗原分子上，那么这两个抗体便是配对抗体。

配对抗体的制备与挑选

需求留意的是，即便两个抗体针对的是不同的抗原决定簇，也并不意味着这两个抗体分子必定能够一起与抗原分子结合。当一个抗体与抗原结合后，有或许会导致其他结合位点（抗原决定簇）构型的改动，然后导致其他的抗体无法正常结合到抗原上。位阻效应的存在，也或许使两个结合位点间隔较近的抗体无法一起结合在抗原上。因而想要得到能够一起结合在抗原分子上的配对抗体，在制备出抗体后，还需求对得到的抗体进行挑选。这就意味着，要制备配对抗体，要完结以下两步作业：抗体的制备；配对抗体的挑选。

抗体制备

为了便于后续的挑选，制备的抗体应为单克隆抗体，一般使用杂交瘤技能进行单克隆抗体的制备。 留意：假如单克隆抗体很少，很或许会找不到能够配对的抗体，因而，在免疫动物的时分，应多免疫几只动物，以取得更多的单克隆抗体。

配对抗体的挑选

一般，配对抗体挑选的办法是双抗夹心 ELISA 法。挑选的原理为：在得到了单克隆抗体后，从中取出两种单克隆抗体，一种作为捕获抗体，另一种作为符号抗体（HRP 酶符号），将捕获抗体包被在抗原板上，先参加抗原，孵育后洗去未结合的抗原，再参加符号抗体 孵育后洗去未结合的符号抗体，最终参加显色液显色。假如能够显色，阐明符号抗体与抗原特异性结合，该捕获抗体与符号抗体为一对配对抗体。假如不能显色，阐明符号抗体不能与抗原结合，然后被洗脱，该捕获抗体与符号抗体不是配对抗体。假如挑选的两种单克隆抗体不能进行配对，则需从头挑选两种单抗，从头进行试验，直至找出能够配对的抗体。

配对抗体的使用

使用双抗夹心法对意图抗原进行定性定量的检测，有必要要用到能够一起与意图抗原结合的配对抗体。关于比较常见的意图抗原，能够经过购买试剂盒的方法得到相应配对抗体。可是市面上试剂盒的品种有限，有些意图蛋白在市面上无法买到对应的试剂盒，为了进行双抗夹心法 ELISA 试验，需进行相应的配对抗体的出产。