技能简介

CUT&Tag（Cleavage Under Targets and Tagmentation）是蛋白质-DNA互作联络研讨的新办法，是新一代超微量ChIP-Seq技能，适用于无ChIP等级抗体的蛋白研讨。与传统的ChIP-Seq研讨办法比较，该技能无需交联、超声打断、结尾抹平缓接头衔接等操作，因而具有省时高 效、所需的样品量少、布景信号低和可重复性好等长处，乃至可用于单细胞水平测序。CUT&Tag有望将蛋白质-DNA互作的研讨变成一种相似PCR反响的惯例操作，对基因调控、表观遗传等范畴的研讨具有革命性的含义。

产品优势

样品开始量低：可以对及少数样品进行剖析

无需ChIP等级抗体：无需供给ChIP等级抗体

性价比高：布景噪音低，所需测序深度少

试验重复性好：试验重复成果一致性好

技能原理

ChiTag是Protein AG蛋白与Tn5转座酶的交融蛋白，当抗体结合意图蛋白（如转录因子、组蛋白等）后，Protein AG蛋白可直接结合抗体，带着的Tn5转座酶可特异性的切开意图蛋白邻近的DNA pian段，并将DNA pian段连上接头，文库构建之后可进行高通量测序。

图注： CUT&Tag试验流程

事例解析

CUT&Tag技能研讨蛋白质-DNA互作的优势

原文：CUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells

期刊：Nature Communications 宣布时刻：20190429 影响因子： 11.878

在生物学研讨中，DNA与蛋白质之间的互作是至关重要的，参加基因的表达、调控、仿制、重组和修正以及RNA的转运、翻译和调控等多个进程，简直触及一切的生命活动。现在研讨两者互作的办法许多，作者挑选了传统的研讨手法ChIP-seq，优化的CUT&RUN办法，以及新办法CUT&Tag共同研讨组蛋白H3K27me3。经过比对试验成果，发现CUT&Tag有*低的布景噪声以及zui强的信号。经过对H3K4me1修饰物进行剖析，显现CUT&Tag的灵敏度*高，试验可重复性*好。

图注. CUT&Tag办法的长处

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