- 1、小猪外链里发表的文章仅代表作者本人的观点,与本网站立场无关。
2、小猪外链网资源分享仅为个人学习、交流之用,同时向原著作者表达敬意。
3、小猪外链网仅提供信息存储空间服务,小猪外链网信息均来源于用户自行发布,不承担任何法律责任。如发现本站有涉嫌抄袭侵权/违法违规的内容,可以按照《小猪外链网文章侵权处理流程》进行处理,同时向原著作者表达敬意。
4、内容由网友自主上传,如有侵权、违规请联系邮箱616859395@qq.com进行处理。


细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技能。可分为瞬时转染,安稳转染等。瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中,因而一个宿主细胞可存在多个拷贝数,发生高水平的表达,但一般只继续几天,多用于发动子和其他调控元件的剖析。一般来说,超螺旋质粒 DNA 转染功率较高,在转染后 24-72 h 内剖析成果,常常用到一些陈述体系如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来协助检测。安稳转染是指外源 DNA 既可以整合到宿主染色体中,也或许作为一种游离体存在。虽然线性 DNA 比超螺旋 DNA 转入量低但整合率高。外源 DNA 整合到染色体中概率很小,一般需求一些选择性符号重复挑选得到安稳转染的同源细胞系。
主要有下面几种办法:
化学法:磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、阳离子脂质体法;物理法:电穿孔法、显微注射法、biolistic 颗粒传递法;病毒介导法:逆转录病毒、腺病毒
A. 阳离子脂质体法:
带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团构成复合物被细胞内吞。进程如下:
特色:
简略通用,适用性广,转染功率高,重复性好,但转染时需除血清,转染功率随细胞类型改变大。因为脂质体复合物与贴壁细胞的触摸时机远大于悬浮细胞,所以贴壁比悬浮转染功率要高。悬浮细胞主张运用电穿孔法。
B. 电穿孔法:
使用高压电脉冲对细胞膜的搅扰,使其构成利于核酸进入的微孔。
C. 逆转录病毒(RNA):
经过病毒中膜糖蛋白和宿主细胞外表的受体相互作用进入宿主细胞,之后反转录酶发动组成 DNA 并随机整合到宿主基因组中。
特色:安稳转染,可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等,但带着基因不能太大。
D. 腺病毒(双链 DNA):
先和细胞外表的受体结合,继而在αV 整合素介导下被细胞内吞。
特色:可用于难转染的细胞。
影响转染的要素:
血清 血清影响复合物的构成,下降转染功率
网站公告
近期本站被人为恶意注册及发布垃圾帖,每一个发帖都会经过审核,一经发现违法或垃圾帖的用户,帖子将被删除或封号,请大家共同维护互联网环境,共创美好互联网未来。
详细的发帖规则请阅读:
《小猪外链网发帖规则》
《小猪外链网最新金币规则》
注:本站严禁发布灰色违禁违法内容,如发现立刻永久封号,如开通会员的概不退款。
免责申明:本网站内容由平台入驻会员撰写,除创始人账号外,其他观点仅代表作者本人,不代表小猪外链网立场。如果内容涉及侵犯其他公司、团体的利益、请联系小猪SEO外链网客服举证删除
您的IP:3.16.89.150,2025-05-18 03:47:16,Processed in 0.30395 second(s).