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1.支原体污染的普遍性
支原体污染是细胞培育范畴遇到的性问题,据文献报导,归纳美国食品药品监督管理局(FDA)、美国形式菌种搜集中心(ATCC)等组织收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的均匀份额为30-60%。该数据未计算中国大陆的数据,但能够确认,大陆地区的支原体污染份额与此适当,或更严峻。
2.支原体污染的损害
依据已宣布的支原体污染研讨文献,支原体污染细胞后,简直能影响每一个细胞参数。
1)支原体污染或许导致细胞染色体的反常和损害,改动细胞的代谢、成长、形状、附着。
2)支原体影响被污染细胞的基因表达。相关研讨标明,支原体污染的细胞系与对照组比较,有多达200个基因表达差异达2倍以上。
3)导致MTT等细胞毒性试验成果严峻错误。支原体对MTT有额定还原作用。
4)支原体污染能耗尽养分物,促进代谢堆集,重度支原体污染导致pH改动。
5)诱导或按捺细胞因子表达,并改动培育细胞的代谢、增殖特征及形状。支原体污染能够直接影响L-arginine的代谢
6)支原体污染能够诱导树突状细胞老练,这关于展开人体免疫细胞的肿瘤医治的影响将是灾难性的。
3.支原体污染的隐蔽性
支原体巨细约0.1-0.6微米,体积比病毒稍大,轻度到中度的支原体污染不会显着改动细胞培育液的浑浊度和pH值,也不会导致细胞形状或成长速度的显着改动,所以科研人员很难及时发现体外培育的细胞现已被支原体污染,从而改动了基因表达谱,显现虚伪的试验数据和试验成果。通常情况下,假如不扫除支原体污染要素,许多试验成果往往缺少说服力。2013年,Ding级期刊《Nature》明确要求,在触及细胞培育的科研工作中,有必要进行支原体检测,并扫除其影响。
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