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楼主
1. 适度消化细胞：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时刻可适当放长，一般处理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比较简单掉落，2min足矣，P19Cl6和293细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培育基打散。
2. 好用塑料瓶培育，如果是玻璃瓶,那么能够用鼠尾胶原包被一下培育瓶，或许用盐酸对培育瓶进行蚀刻，或许涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA，也能够协助细胞贴附新的培育瓶，细胞不易贴壁，主张加多聚赖氨酸处理。
3. 正确制造消化液或培育液。
4. 运用适宜的细胞外基质或贴壁试剂。
5. 复苏新的细胞，DI 一周用20%血清协助细胞恢复。
6. 传代接种一定要铺的均匀，防止细胞抱团成长。
7. 细胞传代24小时之内，不要晃动，避免影响贴壁。
8. 体内上皮细胞成长在胶原构成的基膜上，因而培育在有胶原的底物上有利于成长。人或小鼠表皮细胞培育，能够用γ射线照耀后的3T3细胞为养殖层，别的下降pH、Ca2+含量和温度，均有利于上皮细胞成长。
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