摘要：本运用简报介绍了一种定量测定芝麻酱中 26 种真菌毒素的办法，该办法根据 Liu 等人发 表的论文 [1]。首要运用试验室开发的改进 QuEChERS 计划对样品进行萃取和净化，然后 用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱体系串联 Agilent 6460 三重四极杆质谱仪对所得的溶液 进行别离和检测。本文开发的办法经过基质匹配外标校准，具有十分超卓的线性动态范 围，相关系数到达 0.995 或更高。运用该办法检测了 26 种真菌毒素，其定量限 (LOQ) 几 乎均低于当时我国、欧盟及其他监管组织规则的相应最大残留水平 (MRL)。加标试验表 明，大大都回收率都在 60% - 120% 的范围内，各种剖析物的 RSD 均低于 15%。本研讨 开发的办法具有极高的活络度、选择性和准确度，而且具有较高的通量，适用于对实践 样品中的真菌毒素进行方针物筛查。

前语：各种农产品（包括原资料和加工后的食物）简单遭到真菌毒素的 污染，在适合的气候条件下，真菌毒素首要由曲霉属、青霉属、 镰刀菌属以及许多其他真菌物种排泄发生。这些真菌毒素大都都 含有ju毒，乃至具有致癌性 [2,3]。现在，真菌毒素已遭到许多机 构的监管，尤其是在首要农产品（例如，谷物、玉米、牛奶和食 用油）中 [4]。食物中真菌毒素的惯例监测需求选用极端活络且可 靠的办法。 曩昔十年间，高效液相色谱与质谱尤其是串联质谱的联用体系 (HPLC-MS/MS) 经过与免疫亲和净化 (IAC) 或固相萃取 (SPE) 相 结合，已被运用于真菌毒素的检测中。QuEChERS 是一种更通用 的萃取和净化办法，该办法已被扩展至剖析一些常见食物基质 （例如，小麦、面粉、谷物、葡萄酒等）中的真菌毒素 [5-7]。然 而，芝麻酱作为另一种愈加杂乱的食物基质，没有得到深入剖析。 芝麻酱首要由芝麻和花生制成，简单遭到多类真菌毒素的污染， 然后或许导致人类健康危险的添加。这种酱富含脂肪、碳水化合 物、蛋白质和天然色素，因而很难净化。本研讨的意图是经过结 合通用的 QuEChERS 办法与超高效液相色谱/质谱串联体系 (UHPLC-MS/MS)，开宣布一种牢靠的办法，对芝麻酱中的 26 种 常见真菌毒素进行高通量测定。

试验部分 资料和试剂 真菌毒素规范化合物：新茄病镰刀菌烯醇 (NEO)、吐逆毒素 (DON)、3-乙酰基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (3-ADON)、15-乙酰基-脱 氧雪腐镰刀菌烯醇 (15-ADON)、黄曲霉毒素 B1 (AFB1)、黄曲霉毒 素 B2 (AFB2)、黄曲霉毒素 G1 (AFG1)、黄曲霉毒素 G2 (AFG2)、 黄曲霉毒素 M1 (AFM1)、黄曲霉毒素 M2 (AFM2)、T2 毒素、HT-2 毒素、伏马菌素 B1 (FB1)、杂色曲霉素 (ST)、疣孢青霉原 (VER)、 赭曲霉毒素 A (OTA) 和玉米烯酮 (ZEN) 购自 Alexis Corporation； 4,5-二乙酰氧基镰草镰刀菌醇 (DAS)、镰刀菌烯酮-X (FUS-X)、脱环 氧-吐逆毒素 (DOM-1)、胶霉毒素 (GLT)、烟曲霉素 (FUM)、伏马 菌素 B2 (FB2)、伏马菌素 B3 (FB3)、霉酚酸 (MPA) 和蕈青霉素 (PAX) 购自 Romer Lab。一些试剂（例如甲醇、乙腈、甲酸、乙 酸铵和水）为 HPLC 级。其他试剂均为剖析纯级并购自本地供给 商。定制的 QuEChERS 萃取（EN15662 办法）试剂盒和涣散净 化管均购自安捷伦科技公司。 样品萃取和净化 称取样品 (2.5 g) 参加 50 mL 离心管中，并选用两种不同的溶液依 次对样品萃取 30 分钟：20 mL 含 0.1% 甲酸的 80% 乙腈水溶液和 5 mL含 0.1%甲酸的 20%乙腈水溶液。在每次萃取后，均对样品瓶 进行离心，并搜集上清液。然后将两次搜集的上清液混合在一起， 并运用安捷伦 QuEChERS 萃取试剂盒（部件号 5982-5650CH） 经过当即涡旋振动 1 分钟后在 8000 rpm 下离心 5 min 以进行盐析。 然后将上清液转移至洁净的样品瓶中，并运用 20 mL 正己烷进行 萃取，除掉脂质。将保留在基层的剖析物转移至包括 150 mg C18 和 900 mg 硫酸镁的安捷伦 dSPE 净化管（部件号 5982-4956CH） 中。涡旋振动污浊溶液 1 min，然后进行离心。将所得上清液倒 入洁净的涣散管中，该涣散管顺次用 5 mL 乙腈清洗两次。然后将 流过的溶液与清洗溶液混合，并运用旋转蒸发器在 40 °C 下将其蒸 干。最终，将残渣顺次溶解于 1.5 mL 甲醇和 1.0 mL 水中。将所得 到的溶液经过 0.22 µm 滤膜，以便选用 UHPLC-MS/MS 进一步 剖析。

成果与评论 UHPLC-MS/MS 条件的优化 首要将规范化合物进样至质谱仪以确认 MS 收集参数，见表 2。 将真菌毒素分为两组，一组在正离子化形式下进行剖析，另一组 在负离子化形式下进行剖析。如图 1 所示，在优化的 UHPLC 条件下，分别在正离子化形式和负离子化形式下进行剖析的两组真 菌毒素均得到了彻底的基线别离。这一别离成果避免了剖析物的 彼此搅扰，而且还降低了基质自身的搅扰效应。与有必要选用折中 的 HPLC 条件（活动相、梯度曲线）的极性切换办法比较，将真 菌毒素分为正离子化和负离子化两组独自进行剖析可以使这 26 种 真菌毒素取得更高的活络度。