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吸光度原理
l吸光度:当入射光频率与物质分子的轰动频率共同,或许入射光引起物质分子电子能级跃迁,都会产生光学吸收现象。溶液的浓度越高,穿过溶液的分子也会相应地被吸收越多。
l其他:入射光透过物质没有产生任何反响或许改变,直接透过的光即为透射光。弹性散射的产生会引起光改变方向,可是不会引起波长或许能量的改变,反之则为非弹性散射。
吸光度与透过率联系
l测验样品的透过率
l透过率为透过光强度与原始光强的比值
怎样依据您的运用挑选不同的采样附件是至关重要的。这其中就包含您需求考虑您的样品是液体的仍是气体的;样品的光学密度怎样;是要原位测验,仍是进程操控,或许是在一个反响腔室内。从运用动身进行附件挑选,海洋光学为您供给很多附件挑选,从简略的试验室运用(比方比色皿和比色皿支架)到杂乱的采样东西(比方透射探头和活动打针设备等等)。
怎样确认不知道样品的浓度
lLambert-Beer规律是一个线性方程
l运用已知浓度的规范溶液测验其吸光度值
l吸光度值和浓度之间能够树立一条线性联系的规范曲线
l最终经过丈量不知道样品的吸光度值,从线性联系曲线中读取该样品的浓度值
吸光度丈量
依据吸光度的简略完成与易运用,吸光度被广泛运用于液体和气体的光谱丈量技能中。吸光度光谱能够对物质进行定量辨别或许对物质进行指纹认证,亦或能够对溶液中的分子进行浓度定量剖析。
吸光度丈量能够以多种形式出现。或针对液体或对气体,而且还能够将该运用集成到工业运用环境和客户所重视的测验中。样品不再只是运用比色皿作为载体,活动池、浸入式探头、微量进样器、气体存储皿、微量比色皿等等都能够作为采样设备。
运用模块化光谱仪,咱们能够针对特定的吸光度丈量来挑选不同波长规模和分辨率的光谱仪,而且还能在试验室或许现场对整套光学丈量设备进行快速、便利地更改。事实上,依据海洋光学强壮的光谱仪、光源和采样附件的产品线和灵敏易用的调配,能够针对不同的吸光度试验调配出N中挑选。
吸光度丈量的附件挑选
怎样为您的吸光度丈量挑选适宜的采样附件?以下供给一些参阅:
丈量运用环境与地址?更准确地说,什么样的附件能满意您的现场和试验室,而且便利易用?假如测验样品能很简略地运用比色皿或许试管进行丈量,那挑选就能够扩展到比色皿支架(图1)或许其他支架类产品。假如需求进行实时的原位丈量,或许活动液体的丈量,能够挑选透射形浸入式探头(不同光程可选)(图2)或许活动池(图3)等等。
l样品的性状:液体仍是气体?因为气体的特性,咱们要么挑选高浓度样品,要么挑选长光程容器进行丈量。依据不同的样品,10cm光程的容器一般都足够了,比方CUV-UV-10(图4),或许运用准直透镜直接接触到样品中进行测验。
l测验样品的光学密度怎样?光学密度OD值直接影响您对测验样品不同光程容器的挑选。光学密度越高,所需求的光程就越短。比方,SpecVette™作为高浓度样品的抱负配件,它的光程能够短至250µm,别的还有1cm和10cm的规范配件可选。别的一方面,低OD的样品需求长光程配件,比方能够扩展到500cm的长光程流通池(图3)便是比较好的挑选。假如您需求了解更多样品浓度与光程之间的联系信息,请参阅比尔-朗博规律的详细介绍。
l样品的体积怎样?丈量样品的体积也影响采样附件的挑选。针对低于2uL的微量样品,能够挑选微量比色皿(图5)和微量取样器(图6)
针对接连活动的样品怎样挑选?形活动打针设备(图7),毛细管电泳池(图8),还包含那些能够运用泵设备/塑料套管衔接的设备(图9)都是活动样品丈量吸光度的挑选。
吸光度丈量采样附件挑选一览表
类型 | 可选 | 最佳运用环境 |
比色皿 | 石英和塑料 | 试验室 |
比色皿支架 | 规范或许多用途; 恒温操控; 可与光谱仪集成 | 试验室; 准确温控试验; |
小体积,短光程采样 | 5 µl 比色皿; 250 µm短光程附件 | 核酸和蛋白质或许其他小体积样品剖析; 光学密度较高的样品(比方墨水和染料)测验 |
流通池 | Z形流通池取样剖析; 小体积样品池; | 微量液体的测验; 低浓度测验; 进程操控 |
浸入式探头 | 严苛的试验环境; 高温、高压环境 | 试验室运用; 严苛的化学或许物理环境 |
吸光度规范品 | NIST可追溯规范品; UV (200-450 nm) ; 可见 (400-900 nm) | 质量操控; 对吸光度要求很高的运用环境 |
Maya2000 Pro | TEC传感器 | 猫掌外链
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