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1、挑选适合的养分物质
整体而言,一切微生物成长繁衍均需求培育基含有碳源、氮源、无机盐、成长因子、水及动力,但因为微生物养分类型杂乱,不同微生物对养分物质的需求是不一样的,因而首要要根据不同微生物的养分需求制造针对性强的培育基。自养型微生物能从简略的元机物组成本身需求的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等杂乱的有机物,因而培育自养型微生物的培育基完全能够(或应该)由简略的无机物组成。例如,培育化能自养型的氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxdans)的培育基组成见表3.9。在该培育基制造过程中并末专门参加其他碳源物质,而是依托空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌供给碳源。
就微生物首要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培育它们所需的培育基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培育基(或简称一般肉汤培育基)培育细菌,用高氏I号组成培育基培育放线菌,培育酵母菌一般用麦芽汁培育基,培育霉菌则一般用查氏组成培育基。
2、养分物质浓度及配比适宜
培育基中养分物质浓度适宜时微生物才干成长杰出,养分物质浓度过低时不能满意微生物正常成长所需,浓度过高时则可能对微生物成长起按捺效果,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能保持和促进微生物的成长,反而起到抑菌或杀菌效果。别的,培育基中各养分物质之间的浓度配比也直接影响微生物的成长繁衍和(或)代谢产品的构成和堆集,其间碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培育基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培育基中复原糖与粗蛋白之比。例如,在使用微生物发酵出产谷氨酸的过程中,培育基碳氮比为4/l时,菌体很多繁衍,谷氨酸堆集少;当培育基碳氮比为3/l时,菌体繁衍遭到按捺,谷氨酸产值则很多添加。再如,在抗
生素发酵出产过程中,能够经过操控培育基中速效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的份额来操控菌体成长与抗生素的组成和谐。
3、操控pH条件
培育基的pH有必要操控在必定的规模内,以满意不同类型微生物的成长繁衍或发生代谢产品。各类微生物成长繁衍或发生代谢产品的最适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7~7.5规模内成长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6规模内成长。值得注意的是,在微生物成长繁衍和代谢过程中,因为养分物质被分化使用和代谢产品的构成与堆集,会导致培育基pH发生变化,若不对培育基pH条件进行操控,往往导致微生物成长速度下降或(和)代谢产品产值下降。因而,为了保持培育基pH的相对安稳,通常在培育基中参加pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4 和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培育基中酸性物质堆集导致H+浓度添加时,H+与弱碱性盐结合构成弱酸性化合物,培育基pH不会过度下降;假如培育基中OH-浓度添加,OH-则与弱酸性盐结合构成弱碱性化合物,培育基pH也不会过度升高。
但KH2PO4 和K2HPO4缓冲体系只能在必定的pH规模(pH6.4~7.2)内起调理效果。有些微生物,如乳酸菌能很多产酸,上述缓冲体系就难以起到缓冲效果,此刻可在培育基中添加难溶的碳酸盐(如CaCO3)来进行调理,CaCO3难溶于水,不会使培育基pH过度升高,但它能够不断中和微生物发生的酸,一起释放出CO2,将培育基pH操控在必定规模内。
在培育基中还存在一些天然的缓冲体系,如氨基酸、肽、蛋白质都归于两性电解质,也可起到缓冲剂的效果。
4、操控氧化复原电位(redox potential)
不同类型微生物成长对氧化复原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常成长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下成长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产品的影响。在pH相对安稳的条件下,可经过添加通气量(如振动培育、拌和)进步培育基的氧分压,或参加氧化剂,然后添加F值;在培育基中参加抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等复原性物质可下降F值。
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