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版块:机械制造   类型:普通   作者:化工产业技术分享   查看:72   回复:0   获赞:0   时间:2022-05-18 17:45:36

293细胞系是从原代胚胎人类肾脏中树立的永丨久性细胞系人类腺病毒5型DNA。腺病毒E1区(E1a和E1b)编码的基因是在这些细胞中表达,并参加病毒启动子的反式激活,使这些细胞发生高水平的蛋白质。E1还弥补了重组腺病毒载体中的E1缺失,答应病毒仿制。咱们的293/Cas9细胞系安稳表达Cas9和嘌呤霉素抗性基因。运用逆转录病毒将Cas9和嘌呤霉素抗性基因导入亲代293细胞。

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图:293/Cas9细胞系表达Cas9蛋白。293个细胞或293/Cas9细胞用RIPA缓冲液,并运用Cell BiolabCas9 ELISA试剂盒(Cat#PRB-5079)检测Cas9蛋白水平。

Cell Biolabs艾美捷293细胞系培育办法:

从冷冻细胞树立293/Cas9培育基:

1.将10毫升完好的DMEM成长培育基放入50毫升锥形管中。冻结冷冻的食物在37°C水浴中悄悄拌和,在1-2分钟内冷冻细胞。净化空气用70%(v/v)乙醇擦洗冷冻瓶外表。

2.将冻结的细胞悬浮液转移到含有10mL成长培育基的锥形管中。

3.在室温下以1000 rpm的转速离心5分钟,搜集细胞。移除经过抽吸培育基。

4.悄悄移液,将细胞从头放入锥形管中的15毫升新鲜成长培育基中然后倒下。

5.将15毫升细胞悬浮液转移到T-75组织培育瓶中。将电池置于37°C的环境中培育箱中的二氧化碳浓度为5%。

6.每天监测细胞密度。细胞应在培育物到达95%汇合时传代。

Cell Biolabs:细胞学试剂品牌,为生物技能和研讨类客户供给根据细胞功用研讨以及疾病等方面的技能和服务。首要包括细胞研讨、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研讨、病原体和毒素、干细胞研讨等范畴。

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Cell Biolabs 相关研讨方案:

1.CBA-100:细胞挑选™ 24孔细胞搬迁实验(波顿室实验,比色法)

2.CBA-106:细胞挑选™ 96孔细胞搬迁实验(Boyden小室实验,荧光法)

3.CBA-110:细胞挑选™ 24孔细胞侵袭实验(波顿室实验,比色法)

4.CBA-120:细胞挑选™ 24孔创伤愈合实验

艾美捷科技是Cell Biolabs的我国代理商,为科研工作者供给优质的产品与服务。



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