在细胞培育进程中会呈现这样或那样的问题，这些问题从细胞成长视点来说，针对细胞不贴壁、成长缓慢、成长欠好，乃至逝世的原因，咱们做以下剖析并提出相对应的解决方法。

一、培育细胞不贴壁
或许原因：
胰蛋白酶消化过度；
支原体污染；
培育基pH值过碱（NaHCO3分化）；
细胞老化；
接种细胞开始浓度太低或太高。

解决方法：
缩短胰蛋白酶消化时刻或下降胰蛋白酶浓度；
别离培育物，检测支原体。清洁支架或培育箱。如发现支原体污染，丢掉培育物；
运用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2；
启用新的保种细胞；
调理最佳接种细胞浓度。

二、培育细胞成长缓慢
或许原因：
因为替换不同培育液或血清；
培育液中一些细胞成长必需成分如谷氨酰胺或成长因子耗尽或缺少或已被损坏；
培育物中有少数细菌或真菌污染；
试剂保存不妥；
接种细胞开始浓度太低；
细胞已老化；
支原体污染 。

解决方法：
比较新培育液与原培育液成分，比较新血清与旧血清支撑细胞成长试验，让细胞逐步习惯新培育液；
换入新鲜装备培育液，或补加谷氨酰胺及成长因子；
用无抗生素培育液培育，如发现污染，丢掉培育物；
血清需保存在-10到-20℃。培育液需在2-8℃避光保存。含血清彻底培育液在2-8℃保存，需在1周内用完；
添加接种细胞开始浓度；
换用新的保种细胞；
别离培育物，检测支原体。清洁支架和培育箱。如发现支原体污染，丢掉培育物。

三、培育细胞成长欠好
或许原因：
细胞自身的状况
细胞传代次数多，细胞老化；
细胞的接种量：接种量过低，细胞成长缓慢；
细胞传代时刻过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞成长；
胰酶消化时刻过长或过短：时刻过长，细胞逝世；时刻过短，细胞未彻底别离而成团，细胞逝世；
细胞的冻存与复苏：慢冻速融。

污染
支原体污染；
霉菌污染。
培育基或血清
替换血清或培育基之前未进行验证；
挑选的培育基是否适宜；
培育基制造是否准确无误。

培育环境
CO2供给是否正常；
培育箱或摇床温度操控是否正确。

解决方法：
依据以上四个方面的或许原因，做出针对性的解决方案
留意细胞的自身状况：如传代次数、接种量等；
防止发生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；
要用适宜的血清或培育基，最好通过验证；
留意试验室的环境。

四、培育细胞逝世
或许原因：
培育箱内无CO2；
培育箱内温度动摇太大；
细胞冻存或复苏进程中损害；
培育液渗透压不正确；
培育液中有毒代谢产品堆积 。

解决方法：
检测培育箱内CO2；
查看培育箱内温度；
取新的保存细胞种；
检测培育液渗透压；
换入新鲜培育液。