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本篇转载色谱光谱剖析大众号
检硕科学器件(上海)有限公司
氰基柱、氨基柱的运用和清洗和保存
1、氨基柱的运用
氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8简略水解,所以首先要做好其运用寿命稍逊的心理预备,特别是当运用条件是反相条件下时。
反相条件运用时,要特别注意操控PH值规模,PH值越低越有产生水解的风险,活动相中水的份额越高当然也越有产生水解的风险。
所以,在运用后以及预备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
当运用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的剖析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,或许会使略带负电荷的氨基官能团质子化,运用一段时间后关于某类的剖析物保存性质有所改动或体现为柱效下降。
这时,主张:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲刷该柱(冲刷后当然要再用不含碱的活动相洗去剩余氨),之后再进行剖析这类酸性剖析物时主张在活动相中稍微增加少量氨如0.1%。
2、氨基柱的清洗
简略说起来,正相条件下运用的氨基柱参照硅胶柱的清洗办法;反相条件下运用的氨基柱参照C18的清洗办法。
(1)往常在正相条件下运用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大需恰当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到往常运用的正相活动相,即可。
(2)往常在反相条件下运用:
缓冲盐应及时冲刷,不能直接用纯甲醇冲刷缓冲盐等,属知识就不作特别交待。
用50倍纯甲醇冲刷;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲刷色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
这些清洗办法,主要是针对当样品中有杂质逐渐吸附累积到填料上时的处理办法,色谱柱体现行为为比如柱压增高柱效降低一级。
3、氨基柱的保存
正相运用时,将柱子冲刷洁净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。
反相运用时,如短期不必,可用甲醇或乙腈保存;长时间不必时需将甲醇顺次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。
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