原代细胞培育，也称初代培育，是从供体获得安排细胞后在体外进行的培育。办法包含安排块培育法，消化培育法，器官培育法和悬浮细胞培育法。

初代消化培育法

1. 预备：取各种已消毒的培育用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开端作业前先洗手、75%酒精擦洗手至肘部。

2. 布局：点着酒精灯，装置吸管帽。

3. 处理安排：把安排块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如置疑安排或许污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。

4. 剪切：用眼科剪把安排切成2~3毫米巨细的块，以便于消化。参加比安排块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后同时倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。

5. 消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇摆一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时刻依安排块的巨细和安排的硬度而定。

6. 别离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少量消化液在镜下调查，如安排已涣散成细胞团或单个细胞，当即停止消化，随即经过适合不锈钢筛，滤掉没有充沛消化开的安排块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，参加适量含有血清的培育液。

7. 计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培育液调整后，分装入培育瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4规模，培育液呈微赤色，如色彩偏黄，阐明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8. 培育：置于36.5℃温箱培育，如用CO2温箱培育，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽阻塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需求换新塞。

留意事项：

1、安排块培育法：

（1）刚接种后，安排块粘附不结实，调查和搬运过程中动作要轻，以防引起液体振动，使安排块漂起

（2）培育初期，要留意调查有无细菌、霉菌污染

（3）原代培育要及时调查，记载

（4）过3-5天，需求换液以除掉漂浮安排块和残留的血细胞，确保原代细胞正常成长

2、消化培育法：某些特别类型细胞如内皮细胞需用特别的消化手法和过程进行。

3、器官培育和安排块培育相似；

4、悬浮细胞培育法:留意调整细胞浓度。