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版块:机械制造   类型:普通   作者:化工产业技术分享   查看:69   回复:0   获赞:0   时间:2022-05-18 18:18:32

前语:傅立叶改换红外 (FTIR) 成像是一项老练的剖析办法,可一起取得微米级规模的光 谱和空间信息。这一技能已广泛用于多种不同的运用领域,从高分子科学到生物 医学成像。近年来,人们越来越重视经过首要运用根据同步加速器的体系,来提 高遭到衍射极限约束的 FTIR 成像体系的空间分辩率。 在本运用简报中,咱们展现了一项运用现有物镜完成扩大增强的新式办法。最 终,咱们的 FTIR 体系显现出 1 µm/像素等级的高空间分辩率成像才能。共同的 是,这种构造在设置不同的扩大倍率时不需替换物镜,然后坚持了惯例物镜相对 较大的作业间隔(约 21 mm)。


为评价和比较新办法的功能,咱们别离运用规范扩大倍率 FTIR、高扩大倍率 FTIR 以及多光束同步加速器 FTIR 对生物 医学样品(未固定的鼠脑冷冻切片)进行 FTIR 成像剖析 [1]。


试验部分 仪器 咱们将安捷伦科技公司的 Cary 670 FTIR 光谱仪和带有高能 量碳化硅棒光源的 Cary 620 FTIR 合作运用,别离在规范放 大和高倍扩大条件下收集数据。为进行比较,咱们还运用 了配备有多光束同步加速器 (IRENI) 光源的非安捷伦 FTIR 成像体系收集数据 [1]。

每种技能的操作参数列于表 1。

成果和评论 图 1 A-C 的相片和化学图画中清楚地显现出 3xTG AD 小鼠 脑中丰厚的重要组分。这些图画别离来自于安捷伦规范配 置显微镜、同步加速器 (IRENI) 体系以及安捷伦高倍扩大配 置显微镜。


成果标明,安捷伦新式高分辩率技能明显进步了空间分辩 率,可达 1.1 µm/像素,与之比较,安捷伦规范装备显微镜 的空间分辩率仅为 5.5 µm/像素。多光束同步加速器光源 (IRENI) 带有宽场照明和在整个光谱规模内到达或逾越衍射 极限的有用几许分辩率,与之比较,咱们的新式改进办法可 至少取得与 IRENI 适当的成果

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当调查微米级样品时,添加的空间与光谱细节(经过削减像 素之间的含糊完成)十分有价值,因为所提醒的这些信息是 规范装备的显微镜无法分辩的。 当像素分辩率为 5.5 µm/像素时,光谱图显现的是采样像素 区域内一切化学组分的总和。咱们的新式办法运用软件控 制和自动化“高扩大倍率机制”添加了有用扩大倍率,更重 要的是不需改动物镜,因而可在坚持完好的 21 mm 物镜工 作间隔的前提下,完成 1.1 µm/像素的像素分辩率。


在图 2 的比如中,图顶用箭头标出的部分是体积更小、高 度集合的物体,在更大的像素内将不可调查到这一现象。 更为重要的是,跟着空间分辩率的进步,剖析人员可取得更 “纯”的 FTIR 光谱,如图所示,脂类的 CH 吸收峰在高扩大 倍率方式下具有更高的强度,而在规范扩大倍率方式下则因 被均匀而强度较低。比较光谱显现于图 2 中。 图 3 (A) 显现了细密斑块中心的图画,(B) 周围渗入了脂质 状组分 [2]。这张图标明,正如预期的那样,在这个波长区 域内,运用高扩大倍率仪器可取得与 IRENI(见图 1 B iv) 相同水平的细节信息。

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定论 成果标明,与规范扩大倍率 (5.5 µm) 比较,高扩大倍率模 式 (1.1 µm) 可以供给更多的光谱和空间细节信息;与根据 同步加速器的高扩大倍率体系比较,咱们的高扩大倍率方式 可取得适当的或更好的细节信息,特别是在低于 1800 cm-1 的信息丰厚的指纹区。 此外,因为运用了更大的视界和全尺度 (128x128) FPA,新 型办法的图画收集时间比作为金规范的多光束同步加速器仪 器快了约 10 倍。 别的,规范扩大倍率 (5.5 µm) 和高扩大倍率 (1.1 µm) 方式 操作时不需改动物镜,因而可坚持 21 mm 的全物镜作业距 离,这就意味着用户将样品放置在显微镜物镜下丈量时,不 需遭到样品形状、巨细以及方式的约束。


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回复:运用新扩大增强办法完成生物医学安排样品的高空间分辨率 FTIR 成像

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